Différentiation d'Osteogeic : Pour des analyses osteogenic in vitro, MSCs ont été replaqués dans le milieu de commande à 3 x 103 cellulescm2 dans des plats de culture du tissu 6-well. Le jour suivant (jour 0), le milieu frais de commande a été fourni, et les cellules ont été plus tard développées dans l'absence ou la présence des suppléments d'Osteogenic (OS).

Différentiation d'Osteogenic pour le dexamethasone inclus moyen du rat BMMSC 10 nM, ?-glycérophosphate de 10 millimètres, et acide ascorbique de 200 ?M dans le plein MEM ? milieu de culture ci-dessus.

ALPES souillant : L'activité enzymatique alkaline de phosphatase (APase) de la couche de cellules a été mesurée en triple

cultures en rinçant deux fois par la solution du sel équilibrée de Tyrode, et alors incubation

cellules avec 5 millimètres de phosphate de p-nitrophényle en 50 millimètres de glycine, 1 millimètre de mgcl2, pH 10.5, à 37°C pendant 5 à 20 minutes. L'activité enzymatique de phosphatase alkaline a été calculée après mesure de l'absorbance du produit de p-nitrophénol formée à 405 nm sur un lecteur de microplate. L'activité enzymatique était deux exprimés comme nmol de p-nitrophenol/minute, et p-nitrophenol/cellules min/106.

Méthode de Kossa de von : Des couches de cellules ont été fixées avec de la formaline de 10% pour 1 h, incubé avec la solution de nitrate d'argent de 2% (avecv) pendant 10 minutes dans l'obscurité, lavé complètement avec de l'eau désionisé, et alors exposé à la lumière lumineuse pendant 15 minutes.

Les cellules de tige mesenchymal de bonemarrow dans la troisième culture d'invitro	Les cellules de tige mesenchymal de moelle qui ont différencié aux cellules d'osteoblast